Análisis del complejo proteico asociado a la proteína homóloga de actina (MreB) en Helicobacter pylori

Abstract

RESUMEN: La bacteria Helicobacter pylori presenta una prevalencia mundial mayor al 50%. El patógeno es uno de los agentes etiológicos de gastritis crónica, úlcera péptica y úlcera duodenal. Además es considerado un agente cancerígeno por OMS. A diferencia del resto de bacterias, en H. pylori la proteína del citoesqueleto homóloga a actina, MreB, no participa en la morfogénesis celular. Sin embargo, esta proteína disminuye la actividad de la ureasa. Actualmente, el complejo de proteínas asociadas a MreB no ha sido analizado en H. pylori, por lo que esta investigación tiene como finalidad estudiarlo por primera vez y analizar el papel de esta proteína en la patogénesis de H. pylori. En la presente investigación se identificaron mediante “pull-down” asociado a espectrometría de masas, 86 proteínas de interacción con MreB de H. pylori 26695, entre las que figuraron 9 factores de virulencia (UreB, VacA, ThrC, HydB, HylB, KatA, TsaA, GroEL y SpeA). Se confirmó in vitro usando la técnica de doble híbrido en bacteria, la interacción de MreB con 6 proteínas del complejo (UreB, VacA, HydB, HylB, AddA y MreB) y se descartó la interacción con MreC. Además, se determinaron in silico las interfaces de interacción de MreB con UreB y VacA. El conjunto de resultados fue congruente con la hipótesis que supone que MreB de H. pylori, podría tener un papel en la patogénesis de la bacteria. ABSTRACT: The bacterium Helicobacter pylori infects more than 50% of the population worldwide. The pathogen is one of the etiological agents of chronic gastritis, peptic ulcer and duodenal ulcer. It is also considered as a carcinogenic agent by OMS. Unlike the other bacteria, in H. pylori, the cytoskeleton protein homologous to actin, MreB, does not participate in cellular morphogenesis. However, this protein decreases the activity of urease. These features indicate that MreB in H. pylori could have different funtions or protein-protein interactions. Currently, the protein complex associated with MreB has not been analyzed in H. pylori, so this research aims to study it for the first time and analyze the role of this protein in the pathogenesis of H. pylori. In the present investigation, 86 interacting proteins with MreB of H. pylori 26695, including 9 virulence factors (UreB, VacA, ThrC, HydB, HylB, KatA, TsaA, GroEL and SpeA) were identified by pull-down assay associated to mass spectrometry. It was confirmed in vitro using the double hybrid technique in bacteria the direct interactions of MreB with 6 complex proteins (UreB, VacA, HydB, HylB, AddA and MreB) and the interaction with MreC was rejected. In addition, the interaction interfaces of MreB with two important virulence factors, UreB and VacA, were determined in silico. The results were congruent with the hypothesis that H. pylori MreB could have an important role in the pathogenesis of the bacteria.