Análisis molecular del gen HOXB13 como factor de riesgo para el desarrollo de cáncer cervical en mujeres mexicanas

Abstract

RESUMEN: Antecedentes: El cáncer cervical (CC), es una enfermedad que se caracteriza por la transformación anormal de las células del epitelio del cérvix aunada a una proliferación descontrolada con la capacidad de emigrar hacia otras regiones. Existen múltiples factores implicados en el desarrollo neoplásico del cáncer cervical, entre ellos los factores genéticos, en donde se han propuesto diversos genes candidatos, como los genes HOX,cuyas alteraciones tienen una importante implicación en el desarrollo de diversos tipos de neoplasias, como es el caso de la mutación G84E, considerada como un factor de riesgo para el desarrollo del cáncer de próstata en hombres de ascendencia europea. Objetivo: Realizar el análisis molecular del gen HOXB13 como factor de riesgo para el desarrollo de cáncer cervical, en mujeres mexicanas. Materiales y Métodos: El total de muestras analizadas en este estudio fueron de 48 en población con CC y 48 en población sana. Mediante el uso de técnicas moleculares (PCR PF y secuenciación por método de Sanger) se llevó a cabo la amplificación y la identificación de variantes de los exones del gen HOXB13. Posteriormente se llevó a cabo una estadística descriptiva de las características clínico-epidemiológica de la población con CC. A partir de las variantes identificadas fueron obtenidos los genotipos para determinar las frecuencias alélicas y genotípicas tanto en mujeres con CC, como en población sana y determinar el equilibrio de Hardy Weinberg y su significancia estadística (p<0.05). Posteriormente, aquellas variantes observadas en la región codificante y con cambio de aminoácido, fueron analizadas mediante el programa bioinformático PolyPhen 2 con la finalidad de determinar presencia o ausencia daño funcional en la proteína y su posible implicación en CC. Resultado: Fueron identificadas un total de 6 variantes en el gen HOXB13, en los cuales las variantes: del. AGA/AdelA, c. C>A y c. G>A fueron identificadas en la región no traducible del gen (3´UTR) y 3 variantes en la región codificante (CDS): c. 710 C>T, c. 513 T>C y c. 366 C>T, de las cuales: c. 710 C>T, del. AGA/AdelA y c. C>T mostraron ser estadísticamente significativas (P <0.05), es decir, que la presencia de estas variantes pudieran estar relacionadas en el CC. Además, se identificó la presencia de una mutación del tipo no sinónimo de c.710 C>T / p.Ala237Val en la región codificante XI del gen y tras el análisis bioinformático realizado se determinó un efecto benigno sobre el cambio de aminoácido. Sin embargo, tras el análisis estadístico realizado, no se descarta su posible implicación en el CC, por lo que se sugiere llevar a cabo estudios complementarios de la proteína. En relación a las características clínico-demográficas, el 33% de las mujeres con CC presentaron tener antecedentes familiares con algún tipo de cáncer, esto aunado al nivel socioeconómico (medio-bajo) y a la escolaridad (primaria) que tuvo la mayoría de las mujeres con CC, pudieran estar implicadas en la falta de atención médica oportuna y al limitado acceso a la información de prevención, por lo que son factores importantes implicados en el desarrollo del CC. Conclusión: Se identificaron variantes génicas dentro del gen HOXB13 de pacientes mexicanas con CC que pudieran estar implicadas en su desarrollo. ABSTRACT: Background: Cervical cancer (CC) characterized by the uncontrolled growth of the cells of the epithelium of the cervix coupled with the ability to migrate to other regions. Multiple factors involved in the neoplastic development of cervical cancer, such as genetic factors, where several candidate genes have been proposed, for example the HOX genes, whose alterations have an important implication in the development of various types of neoplasms, such as case of the G84E mutation, considered as a risk factor for the development of prostate cancer in men of European descent. Objective: To carry out the molecular analysis of the HOXB13 gene as a risk factor for the development of cervical cancer in Mexican women. Materials and Methods: Fourthy eight samples were analyzed as study population with CC and 48 as healthy population. Through the use of molecular techniques (PCR-PF and sequencing by Sanger's method) the amplification and identification of exon variants of the HOXB13 gene was carried out. Subsequently, a descriptive statistic of the clinical epidemiological characteristics of the population with CC was carried out. From the identified variants, genotypes were obtained to determine allelic and genotypic frequencies in both women with CC, as in healthy population and to determine the Hardy Weinberg equilibrium and its statistical significance (P <0.05). Subsequently, those variants observed in the coding region and with amino acid change were analyzed using the bioinformatics program PolyPhen 2 in order to determine the presence or absence of functional damage in the protein and its possible involvement in CC. Result: A total of 6 variants were identified in the HOXB13 gene, in which the variants: del. AGA / AdelA, c. C> A and c. G> A were identified in the non-translatable region of the gene (3´UTR) and 3 variants in the coding region (CDS): c. 710 C> T, c. 513 T> C and c. 366 C> T, of which: c. 710 C> T, del. AGA / AdelA and c. C> T showed to be statistically significant (P <0.05), that is, the presence of these variants could be related in the CC. In addition, the presence of a non-synonymous mutation of c.710 C> T / p.Ala237Val was identified in the coding region of the gene and after the bioinformatic analysis performed a benign effect on the amino acid change was determined. However, XIII after the statistical analysis performed, its possible involvement in CC is not ruled out, so it is suggested to carry out complementary studies of the protein. In relation to the clinical-demographic characteristics, 33% of women with CC had a family history with some type of cancer, this combined with the socioeconomic level (medium-low) and schooling (primary) that most women had, being able to be involved due to the lack of timely medical attention and limited access to prevention information, as an important factors involved in the development of the CC. Conclusion: Gene variants were identified within the HOXB13 gene of Mexican patients with CC that might be involved in their development.