Evaluación de la función del receptor de prorrenina en células del sistema inmunitario de ratas Wistar con embarazo complicado con preeclampsia

Abstract

RESUMEN: La hipertensión inducida por el embarazo, preeclampsia, es un trastorno multisistémico caracterizado por presión arterial alta, proteinuria y desarrollo intrauterino bajo. Su etiología es desconocida, existen evidencias que sugieren la implicación en la patogénesis de esta enfermedad a una respuesta inflamatoria sistémica excesiva durante el embarazo. El sistema renina-angiotensina (RAS) está implicado en el desarrollo de la preeclampsia. El receptor de prorrenina (PRR) es un componente de este sistema, estudios recientes han demostrado la presencia de este receptor en células del sistema inmunitario provenientes de pacientes con glomerulonefritis, atribuyéndole al PRR un papel proinflamatorio, activando directamente la vía de señalización de las MAPK, induciendo la secreción y liberación de citocinas. Aún no se ha descrito si el PRR activa el PLZF, vía MAPK y vía Wnt en leucocitos de bazo en un modelo experimental de preeclampsia inducida. Por tanto, el objetivo de este trabajo fue evaluar la activación del PRR por las vías vías WNT, MAPK y pH vacuolar en células del sistema inmunitario en un modelo experimental de preeclampsia en ratas Wistar. Se utilizó un modelo de coartación aórtica subrenal (CASR) en ratas Wistar. La expresión de PRR, PLZF, DVL-1, PKC α, p-ERK y TGF-β se determinó por inmunoblot en leucocitos de bazo, los resultados muestran la expresión del PRR, observando un incremento en la expresión proteica de este receptor. Para evaluar su funcionalidad, se determinó la expresión de PLZF encontrando un aumento significativo en su expresión en ratas con CASR, la pérdida de esta proteína tiene un impacto negativo en la función efectora de las células NK y linfocitos CD3+, CD161+ ya que pierden la capacidad de producir citocinas. Las proteínas ERK fosforilado y TGF-b se encuentran sobre expresados en ratas con CASR, indicando que la vía MAPK está activa. Por último los resultados de pH vacuolar por análisis de citometría de flujo, muestran que los leucocitos de bazo de ratas preñadas tienen un pH ácido, sin embargo, las ratas con CASR tienen un pH más elevado. En conclusión encontramos que el PRR está presente en leucocitos totales de bazo y es funcional, activando la vía MAPK preferentemente sobre la vía Wnt, acidificando el pH vacuolar en un modelo experimental de preeclampsia inducida por CASR. ABSTRACT: Pregnancy-induced hypertension, preeclampsia, is a multisystem disorder characterized by high blood pressure, proteinuria, and low intrauterine development. Its etiology is unknown, there is evidence suggesting an excessive systemic inflammatory response during pregnancy in the pathogenesis of this disease. The renin-angiotensin system (RAS) is involved in the development of preeclampsia. The prorenin receptor (PRR) is a component of this system; recent studies have demonstrated the presence of this receptor in immune system cells from patients with glomerulonephritis, attributing to the PRR a proinflammatory role, directly activating the MAPK signaling pathway, inducing the secretion and release of cytokines. It has not yet been described whether PRR activates PLZF via MAPK and Wnt pathway in spleen leukocytes in an experimental model of induced preeclampsia. Therefore, the objective of this work was to evaluate the activation of PRR by WNT, MAPK and vacuolar pH pathways in immune system cells in an experimental model of preeclampsia in Wistar rats. A model of subrenal aortic coarctation (SRAC) was set in Wistar rats. The expression of PRR, PLZF, DVL-1, PKCα, p-ERK and TGF-β was determined by immunoblot in spleen leukocytes, the results show PRR expression, observing an increase in protein expression of this receptor. To assess PRR functionality, expression of PLZF showed a significant increase in its expression in rats with SRAC, the loss of this protein has a negative impact on the effector function of NK cells and CD3+, CD161+ lymphocytes as they lose capacity to produce cytokines. pERK and TGF-β proteins are overexpressed in rats with SRAC, indicating that the MAPK pathway is active. Finally, the results of vacuolar pH by flow cytometry analysis show that spleen leukocytes from pregnant rats have acid pH, however, SRAC rats have a higher pH. In conclusion we found that PRR is present in total spleen leukocytes and is functional, activating the MAPK pathway preferentially on the Wnt pathway, acidifying the vacuolar pH in an experimental model of pre-eclampsia induced by SRAC.