RESUMEN: En el presente estudio, se examinó la expresión de la IL-18 en tejido pulmonar durante el desarrollo de la fibrosis pulmonar (FP) inducida por bleomicina (BL) en ratones utilizado como modelo para el estudio ex vivo de la FP en humanos. Este estudio se basa en el hecho de que la IL-18 es una proteína inductora de la producción de interferón gamma (IFNγ), interleucina que participa en la respuesta inmune celular (TH1). El IFNγ se encuentra sobreexpresado durante la fibrosis pulmonar promoviendo la apoptosis de células alveolares contribuyendo de esta manera al desarrollo de este proceso. El análisis histopatológico y morfológico del tejido pulmonar a los días 12, 17 y 24 después de la instilación de bleomicina mostró diferentes grados de inflamación y/o fibrosis en comparación con aquellos animales instilados con solución salina. El proceso fibrótico esta caracterizado por el depósito de la colágena en el intersticio del tejido pulmonar. Sin embargo los resultados no reflejaron una relación directa entre los niveles de colágena y el grado de fibrosis, debido probablemente a la presencia de proteínas sanguineas en las muestras. Por ensayos inmunoenzimáticos se determinó la presencia de la IL-18 en tejido pulmonar sano y en los diferentes grados de fibrosis por BL. La expresión de IL-18 se encontró incrementada en el proceso inflamatorio severo grado 1 con una disminución progresiva en los grados 2 y 3. Por inmunohistoquímica se determinó que la IL-18 está localizada en el citoplasma de los macrófagos alveolares. La expresión de IFNγ por ELISA en tejido pulmonar sano se encontró a una concentración de 6 ug/ml mientras que en el tejido tratado con BL se presentó una tendencia al incremento en relación con el grado de fibrosis. El IFNγ se detectó principalmente en el espacio intersticial pulmonar. Los resultados indican el modelo de instilación de bleomicina en ratones es util y eficaz para analizar el papel de la respuesta inmune en la FP. Donde la IL-18 es producida por células inflamatorias y del parénquima pulmonar al inicio de la lesión para inducir una respuesta inmune TH1 mediada por IFNγ responsable en gran medida del proceso de fibrosis. La expresión de IL-18 en mayor proporción al inicio de la inflamación que la de IFNγ en el tejido pulmonar tratado con BL es debido probablemente a que la IL-18 es la inductora de la producción de IFNγ en esta respuesta. Estos indicadores parecen tener validéz en la evaluación del desarrollo del proceso fibrótico pulmonar.
ABSTRACT: We examined here the expression of IL-18, during the development of pulmonary fibrosis (PF) induced by bleomycine (BL) in mice wich is a model for the ex vivo study of pulomonary fibrosis in humans. This study is based on the fact that IL-18 is a protein that induces gamma interferon (IFNγ) production.IL-18 and IFNγ are interleuquines that participate in the cellular inmune response (TH1). The IFNγ is found over expressed during the pulmonary fibrotic process promoting apoptosis of alveoli cells contributing to the development of this process. Histopathological and morphological assays of pulmonary tissue on day 12, 17 and 24 after bleomicine instillation different degrees of inflammation and/or fibrosis in comparison to pulmonary tissues from animals instillated with saline solution. The fibrotic process is characterized for the deposit of collagen in the pulmonary intersticial space, however, the results did not reflect a relationship between the levels of this aminoacid and the degree of fibrosis probably due to the presence of plasmatic proteins in samples. The expression, of IL-18 was determined through inmune enzymatic assays in healthy lung tissue and in the different degrees of fibrosis by BL. The expression of this cytokine is reported as arbitrary units that correlates with the degree of histological changes reflecting an elevation in the de sever inflammatory process grade 1 with a progressive decrease in grades 2 and 3. We found presence of IL-18 inside alveoli macrophages through inmunohystochemistry. The expression of IFNγ in healthy lung tissue was detected by ELISA in a concentration of 6 ug/ml. IFNγ increased in relationship with the degree of fibrosis. IFNγ was detected as spots in the pulmonary intersticial space. These results suggest that the model of bleomycine instillation in mice is useful and efficient for analyze the role of the immune response of the pulmonary fibrosis. IL-18 is produced by the inflamamatory cells and the pulmonary parenchyma at the beginning of the damage to induce TH1 immune response mediated by IFNγ, that contribute for the fibrotic process. The presence of IL-18 at the beginning of the inflammation is visualized in agreater proportion that the corresponding expression of IFNγ in the lung tissue treated with BL, probably because IL-18 is the inductor the production of IFNγ in this response. Thus IL-18 and IFNγ could be useful in the evaluation of the development of the fibrotic lung process.
